XI闻 | 突破 “靶向脱瘤毒性”！pH 响应型抗体为癌症免疫治疗精准导航

精准打击”肿瘤细胞的同时避免误伤健康组织，一直是研究者们追求的核心目标。近期发表于《Antibodies》的一项研究，巧妙利用肿瘤微环境的酸性特征，开发出pH依赖性抗AXL抗体，为解决“靶向脱瘤毒性”难题提供了新思路。

一、瞄准环境差异：肿瘤微环境的天然识别码

肿瘤细胞因“瓦博格效应”大量消耗葡萄糖，会释放乳酸和质子，使肿瘤微环境pH降至6-6.5，而健康组织pH维持在7.2-7.4。研究团队瞄准这一差异，以在肿瘤中高表达、且与化疗耐药相关的AXL受体为靶点，通过噬菌体展示技术筛选特异性抗体。

（图片来自参考文献）

二、筛选智能抗体：从 96 个克隆中挑出最优解

研究团队采用噬菌体展示技术，在 pH 5.5 酸性条件下对人源 scFv 噬菌体文库进行三轮淘选，同时通过 TYRO3 蛋白 “预清除” 排除交叉反应，避免抗体 “认错靶点”。最终从 96 个克隆中筛选出 9 个 “环境敏感型” 候选 —— 仅在酸性 pH 下高效结合 AXL，中性 pH 下结合活性显著降低。将其中表现最优的 2 个克隆（D4apH、G10apH）重组为全长 IgG 后，进一步验证显示：pH 6 时二者 EC50 达亚纳摩尔级（0.7 nM、0.6 nM），与传统抗体亲和力相当；pH 7.4 时亲和力骤降 18-28 倍，完美适配 “肿瘤酸性环境激活” 的需求。

（图片来自参考文献）

三、解密开关机制：组氨酸的pH 响应魔法

细胞实验验证：对肿瘤精准结合，对正常细胞零攻击。细胞水平测试更凸显了这类抗体的精准性，在 pH 6.0 模拟肿瘤环境中，D4apH 和 G10apH能结合 63% 以上高表达 AXL 的 MDA-MB-231 乳腺癌细胞；而在 pH 7.4 的生理环境中，结合率骤降至 6% 以下，且对表达 AXL 的健康肌母细胞几乎无结合活性，实现了“零攻击”。这也从细胞层面印证了组氨酸锚点机制：健康组织的中性 pH 让组氨酸无法形成稳定结合，自然避免了 “误伤”。

（图片来自参考文献）

解密 “开关机制”：组氨酸突变实验揭开核心密码。分子机制研究揭示了这种智能响应的本质：抗体结合依赖 AXL 受体 Ig1 结构域的 His61 和 His116 残基。酸性条件下，组氨酸发生质子化，能显著增强与抗体间的氢键和 π- 堆积作用，使结合更紧密；而在中性环境中，组氨酸去质子化，相互作用减弱导致结合力下降，抗体随之“解绑”。

（图片来自参考文献）

这项研究的突破在于，无需复杂的结构改造或大规模突变筛选，仅通过优化噬菌体展示的筛选pH条件，就能构建出兼具高特异性与低毒性的抗体。更重要的是，组氨酸介导的pH依赖结合机制具有普适性，为其他肿瘤相关抗原的抗体开发提供了可复制的范式，有望推动ADC、CAR-T等免疫治疗手段向更安全、更精准的方向发展。

四、技术转化：溪长生物 pH 依赖性改造服务

溪长生物的噬菌体展示抗体 pH 依赖性改造服务，采用定向组氨酸富集策略，精准设计抗体 pH 响应特性，实现靶向组织微环境的选择性结合与循环延长，核心技术突破包括：

1.智能突变设计：在 CDR 区定向引入组氨酸（突变比例 30-50%），构建 pH 敏感型抗体库，精准匹配抗原组氨酸 “锚点”；

2.双重筛选系统：先经中性 pH（7.4）淘选保留抗体基础亲和力，再通过酸性 pH（5.5-6.0）洗脱获得高特异性 pH 依赖性克隆，兼顾活性与选择性；

3.高效改造周期：10 周即可完成从设计到验证的全流程（亲本验证 3-4 周 + 文库构建 / 筛选 4 周 + 纯化验证 2-3 周），加速项目推进。
溪长生物以成熟的技术平台承接这一前沿成果，用标准化、高效化的改造服务，让 “精准靶向” 不再是实验室专属，诚邀您携手解锁创新抗体的转化潜力！

未来，随着这类“环境响应型”抗体的进一步优化，癌症治疗或许能真正实现“哪里有肿瘤酸性微环境，哪里就有精准治疗”的理想场景，为患者带来更低毒性、更高疗效的治疗选择。

参考文献：

Mangeat, T.; Mairaville, C.; Chentouf, M.; Neiveyans, M.; Pugnière, M.; Ngo, G.; Denis, V.; Catherine, C.; Pichard, A.; Deshayes, E.; et al. Generation Using Phage-Display of pH-Dependent Antibodies Against the Tumor-Associated Antigen AXL. Antibodies 2025, 14, 83. https://doi.org/10.3390/antib14040083

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对照药 | 抗药抗体 | 仪器 | 试剂

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