兔单抗技术平台

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溪长生物——噬菌体展示技术×兔单抗开发,解锁高亲和力抗体新势能


溪长生物——噬菌体展示技术×兔单抗开发,解锁高亲和力抗体新势能

作为全球领先的抗体研发CRO,溪长生物创新融合噬菌体展示技术与兔单克隆抗体开发平台,致力于为全球客户提供高多样性、高亲和力的抗体发现解决方案。针对复杂靶点(如GPCR、磷酸化蛋白、病毒抗原),我们以技术革新突破传统开发瓶颈,赋能治疗性抗体、诊断试剂及科研工具开发,加速药物从实验室到临床的转化进程!

技术核心优势

1. 兔源抗体+噬菌体展示:双重优势叠加

  • 兔源抗体特性:兔免疫系统可识别小分子、非折叠蛋白及复杂修饰抗原(如糖基化/磷酸化表位),产生抗体亲和力(KD低至10^-11 M)显著优于鼠源,尤其适用于“难成药”靶点开发。
  • 噬菌体展示技术:构建超大容量兔源免疫文库(库容>10^9-11),通过体外高效筛选,直接获取高特异性单克隆抗体,避免传统杂交瘤技术的细胞融合率低、克隆丢失等问题。

2. 全流程技术闭环,精准高效

  • 智能免疫方案:采用多表位抗原设计,结合个性化免疫周期,最大化激活兔B细胞多样性;
  • 高多样性文库构建:从兔外周血淋巴细胞中提取VH/VL基因,通过ScFv或Fab形式展示于噬菌体表面,保留天然轻重链配对;
  • 定向筛选与优化:
  • 固相/液相筛选:针对可溶性抗原、细胞表面靶点或组织切片,灵活适配筛选策略;
  • 亲和力成熟:通过错配PCR、链替换等技术提升抗体亲和力10-100倍;
  • 人源化改造:基于兔-人抗体框架同源性,保留CDR区活性,降低免疫原性风险。

3. 多维验证体系,确保成药性

  • 结合活性验证:SPR/BLI测定亲和力与动力学参数(Kon/Koff)、ELISA/Flow cytometry验证特异性
  • 功能活性分析:细胞杀伤实验(ADCC/CDC)、受体阻断活性(如中和病毒)、体内药效模型(PDX模型);

可开发性评估:热稳定性(Tm值>70℃)、聚集倾向(SEC-HPLC单体峰>95%)、表达量优化(CHO系统>5g/L)。

制备流程

服务内容

序号

主要步骤

内容

周期

交付结果

1

抗原制备

1. 客户提供抗原3-5mg

2. 表达his、Fc标签抗原(可选)

2-3周

得到足够用于免疫及鉴定的抗原

2

动物免疫

免疫2只新西兰兔/免疫原

8-10周

免疫后效价大于1:100000,如果血清低于1:5000可以选择加强免疫或者终止试验

4免后取兔子血清进行抗原ELISA检测

噬菌体展示纳米文库构建及筛选

1. 提取单核细胞RNA反转录为cDNA,PCR扩增抗体基因; 
2. 酶切连接构建噬菌粒载体,电转至大肠杆菌得到细菌文库,测序分析文库多样性; 
3. 辅助噬菌体侵染构建噬菌体文库

4-6周

提供至少10条特异性结合抗原的抗体序列

1. 根据抗原特性选择筛选方案 
2. 根据富集度进行3-4轮筛选 
3. 挑取192个克隆进行ELISA鉴定 
4. 测序得到阳性克隆序列

3

抗体表达纯化

1. 根据客户要求进行抗体原核(Fab)或真核表达(兔-人嵌合) 
2. 构建载体,优化表达条件,纯化抗体 
3. 纯化抗体活性鉴定(ELISA)

2-3周

提供>0.5mg纯化抗体

4

人源化(可选)

序列分析 
germline选择 
CDR移植 
重组表达 
活性鉴定

2-3周

人源化的序列及蛋白样品(1mg/抗体)

5

文件撰写并转移

完善并转移抗体材料及序列文件报告

1周

转移相关技术报告文件(载体测序报告、纯化蛋白验证报告)

6

总周期

20-24周

文件资料