杂交瘤筛选平台

杂交瘤筛选平台

杂交瘤技术是一种重要的单克隆抗体技术在细胞融合技术的基础上,将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓癌细胞进行融合,通过HAT及特异性筛选,并通过亚克隆得到能够分泌特异性识别目标抗原的单克隆抗体细胞株。将细胞株进行体内或体外培养,经过亲和纯化后得到单克隆抗体。


杂交瘤技术是一种重要的单克隆抗体技术在细胞融合技术的基础上,将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓癌细胞进行融合,通过HAT及特异性筛选,并通过亚克隆得到能够分泌特异性识别目标抗原的单克隆抗体细胞株。将细胞株进行体内或体外培养,经过亲和纯化后得到单克隆抗体。

制备过程

制备原理

  • B细胞可以分泌表达抗体,一个B细胞克隆产生一种抗体;
  • B细胞是一种原代细胞,在体外不能无限传代;

骨髓瘤细胞是一种永久传代的肿瘤细胞,也来源于B细胞,但本身不分泌抗体。骨髓瘤HGPRT酶缺陷,无法在HAT培养基中存活。

服务内容

杂交瘤筛选

服务项目

内容

周期

交付

抗原制备

抗原设计及表达验证、大量表达

4 - 8 周

抗原设计及验证报告,根据需求表达抗原

动物免疫

抗原活性鉴定(可选)、小鼠免疫、效价检测

8-10周

小鼠免疫方案、效价检测报告

融合、筛选及亚克隆

细胞融合、融合检测、亚克隆及冻存

6 - 8 周

抗体融合及亚克隆检测报告、冻存细胞株

抗体生产纯化及活性鉴定

抗体无血清培养、抗体纯化、抗体活性检测

2 - 4 周

纯化抗体、活性检测报告

杂交瘤细胞无血清培养及驯化技术

服务项目

内容

周期

交付

抗体无血清培养及纯化

抗体无血清培养、抗体纯化及纯度检测、抗体活性检测(可选)

2 - 4 周

纯化抗体、抗体纯度检测报告、抗体活性检测报告(可选)

杂交瘤细胞无血清驯化

杂交瘤细胞直接驯化、杂交瘤细胞梯度驯化、驯化细胞无血清表达纯化(可选)

4 - 8 周

细胞驯化报告、冻存细胞(已驯化)、纯化抗体(可选)

杂交瘤抗体测序技术

服务项目

内容

周期

交付

杂交瘤细胞测序

杂交瘤总 RNA 提取、5'RACE cDNA 制备、抗体 VH/VL 基因扩增、TA 克隆及测序、结果分析

1周

测序实验报告、抗体序列、含抗体序列的载体

服务案例

免疫方案

效价检测

融合检测

抗体亚型&重组抗体表达鉴定

文件资料